I pazienti con beta-talassemia trasfusione-dipendente trattati con una singola infusione di cellule staminali modificate geneticamente con un vettore lentivirale in modo da contenere il gene corretto, hanno ottenuto una riduzione significativa del bisogno di trasfusioni.
La terapia genica per la beta-talassemia trasfusionale si basa sul trapianto autologo di cellule staminali ematopoietiche (HSC) ingegnerizzate da vettori lentivirali che esprimono un gene umano della beta-globina regolato dalla trascrizione.
La terapia genica (GT) potrebbe rappresentare un’alternativa al trapianto con il seguente potenziale di vantaggi: utilizzo di cellule staminali autologhe, condizionamento su misura senza necessità di soppressione immunitaria post GT, nessun rischio di GVHD o di rigetto.
I pazienti con beta talassemia trasfusione-dipendente (qualsiasi genotipo) subiscono un prelievo periferico di cellule staminali del sangue in seguito alla mobilizzazione con lenograstim e plerixafor. Dopo la trasduzione delle cellule autologhe CD34 + immuno-selezionate e il rilascio di successo della sostanza congelata, il paziente subisce un regime di condizionamento basato su treosulfan e tiotepa mieloablativo che favorisce l’attecchimento efficiente delle cellule corrette con ridotta tossicità extra-midollare (TIGET-BTHAL; EudraCT numero 2014- 004.860-39). La via di somministrazione delle HSC modificate con il gene è intraossea nelle creste iliache posteriori-superiori allo scopo di migliorare l’attecchimento e minimizzare il filtro endovenoso di primo passaggio.
Tre giorni dopo la terapia genica, leucociti del sangue periferico autologo non stimolati e precedentemente raccolti (1-10 x107 CD3 + / kg) vengono reinfusi per via endovenosa per favorire la ricostituzione immunitaria.
Dopo 2 anni di follow-up, i pazienti saranno seguiti per altri sei anni in uno studio di follow-up a lungo termine. Sulla base di ampi studi preclinici di efficacia e sicurezza, la sperimentazione clinica TIGET-BTHAL è stata approvata e avviata nel 2015 presso l’Istituto Scientifico San Raffaele di Milano.
Lo studio clinico prevede il trattamento di 10 pazienti: 3 adulti (gruppo 1) seguiti da 3 pazienti di età compresa tra 8 e 17 anni (gruppo 2) e 4 pazienti di età compresa tra 3-7 anni (gruppo 3), con una strategia di iscrizione scaglionata basata sulla valutazione di sicurezza ed efficacia preliminare nei pazienti adulti da una scheda di monitoraggio della sicurezza dei dati indipendente (DSMB) prima dell’inclusione di soggetti pediatrici. A marzo 2016 il DSMB ha approvato l’arruolamento dei pazienti del gruppo 2 e, a settembre 2016, dei pazienti del gruppo 3. Ad agosto 2017, sette pazienti (3 adulti di età compresa tra 31-35 anni e 4 pazienti pediatrici di età compresa tra 6 e 13 anni) con diversi genotipi (β0 / β 0 , β + / β + e β 0 / β + ) sono stati trattati con cellule CD34 +trasdotte con GLOBE alla dose di 16×10 6 -19,5×10 6cellule / kg e un numero di copie vettoriali (VCN) / cellule che vanno da 0,7 a 1,5.
Il follow-up mediano è di 13 mesi (range 8-22). La procedura è stata ben tollerata da tutti i pazienti, senza eventi avversi correlati al prodotto, nessuna evidenza di lentivirus responsabile della replicazione, né di proliferazione clonale anomala sulle analisi regolari del sangue periferico e del midollo osseo. Eventi avversi di grado 3-4 o eventi avversi gravi sono stati principalmente di origine infettiva come previsto dopo un autotrapianto mieloablativo. Il tempo mediano per l’attecchimento dei neutrofili è stato di 19 giorni (intervallo 17-25) e per l’attecchimento delle piastrine 15 giorni (range 10-21). L’attecchimento multilineare di cellule marcate con geni è stato osservato nel sangue periferico e nel midollo osseo, con una mediana di 0,58 (range 0,37-1,55) numero / cellula di cellule in GlyA + cellule eritroidi del midollo osseo a 6 mesi dopo GT. Sono stati rilevati profili di integrazioni vettoriali policlonali nei primi 3 pazienti testati. I tre pazienti adulti presentavano una riduzione del fabbisogno trasfusionale, ma dipendevano ancora da trasfusioni all’ultimo follow-up (rispettivamente 22, 18 e 16 mesi). Tra i 4 pazienti pediatrici, 3 hanno interrotto la trasfusione poco dopo la terapia genica e sono indipendenti dalla trasfusione all’ultimo follow-up (rispettivamente 13, 10 e 8 mesi). Un paziente pediatrico continua a ricevere trasfusioni di sangue regolari.
È stata osservata una correlazione tra il livello di attecchimento delle cellule marcate dal gene nel sangue periferico e nel midollo osseo e il fabbisogno trasfusionale. Dati preliminari suggeriscono che il protocollo clinico applicato per la terapia genica con GLOBE LV è ben tollerato e porta a requisiti di trasfusione significativamente ridotti.
La terapia genica della B-talassemia è stata sviluppata dalla Fondazione Telethon e dall’Ospedale San Raffaele.
Fonte: ASH
