Funghi antitumorali!

In un recente studio pubblicato sulla rivista Medical Sciences Forum, ricercatori portoghesi hanno ampliato studi precedenti che avevano dimostrato l’attività antitumorale di una piccola frazione di RNA (sRNA) ottenuta dal Cantharellus cibarius (CCI), un fungo chiamato anche gallinaccio dorato. Il presente studio indaga il potenziale antitumorale dell’sRNA di Boletus edulis (Porcini) e Agaricus bisporus ( Portobello). Ha inoltre valutato se i microRNA di questi funghi possano avere proprietà antitumorali.

Esperimenti su linee cellulari normali e tumorali hanno rivelato che mentre tutti gli sRNA dei funghi mostravano proprietà antitumorali, le loro attività relative variavano ampiamente, suggerendo che gli sRNA antitumorali sono arricchiti in sequenze specifiche. Questi risultati evidenziano il potenziale dei funghi come fonti di biomolecole con potenziale antitumorale e illustrano la necessità di ulteriori ricerche su frutta, verdura e (in questo caso) funghi comunemente disponibili con il potenziale di scoprire notevoli bioattivi con sostanziale applicazione medica.

Una breve storia dell’applicazione dei funghi nella ricerca sul cancro

Nonostante finora siano stati descritti oltre 14.000 di questi funghi, solo una frazione è sicura per il consumo umano. Queste poche specie, tuttavia, sono state fondamentali nelle diete di quasi tutte le culture e civiltà. Alcune culture (soprattutto asiatiche) hanno utilizzato i “funghi medicinali” per curare le infezioni per centinaia di anni, ma il potenziale  globale delle proprietà cliniche dei funghi è stato, fino a tempi recenti, ampiamente ignorato.

Con il crescente interesse per la bioprospezione (la ricerca scientifica di prodotti biochimici o genetici naturali con applicazioni benefiche), la ricerca medica ha iniziato a selezionare le biomolecole dei funghi per potenziali applicazioni farmaceutiche. Negli ultimi decenni sono stati descritti numerosi nutraceutici con poteri antiossidanti, antitumorali, antinfiammatori e neurologicamente benefici. La ricerca antitumorale sui funghi ha recentemente ricevuto particolare attenzione grazie alla descrizione di frazioni di piccoli RNA (sRNA) idrosolubili isolati da Cantharellus cibarius (CCI) e Boletus edulis (BED) che mostrano potenti effetti di induzione dell’apoptosi e di inibizione della proliferazione cellulare.

Sfortunatamente, i meccanismi d’azione di questi sRNA rimangono sconosciuti. L’identificazione di questi meccanismi e l’espansione dei campioni di specie di funghi andrebbero a vantaggio sia dell’industria medica che di quella nutrizionale: la prima in quanto costituirà la base per la ricerca futura sull’ottimizzazione di questi benefici antitumorali (dosaggi, potenziale tossicità in vivo) e la seconda promuovendo il caso per i benefici nutrizionali di questi tesori di nutraceutici.

A proposito dello studio

Nel presente studio, BED e Agaricus bisporus  (ABI), comunemente noto come Portobello, due specie di funghi finora non testate e raccolte a Trás-os-Montes e Alto Douro (Portogallo), sono state confrontate con frazioni di sRNA di CCI per indagare il potenziale contro il cancro dei loro sRNA. Poiché lavori precedenti avevano ipotizzato che i microRNA (miRNA) potessero svolgere anche funzioni antitumorali, sono stati valutati anche i miRNA di tutte e tre le specie. Tutti i campioni sono stati liofilizzati (liofilizzati) dopo la raccolta per prevenire la degradazione dell’RNA e mantenere la freschezza del campione.

Gli sRNA sono stati estratti utilizzando la cromatografia a scambio anionico utilizzando i protocolli descritti da Lemieszek et al. I miRNA sono stati estratti utilizzando il kit di isolamento MirVana miRNA. Per le valutazioni di efficacia in vivo , sono state utilizzate la linea cellulare tumorale Caco-2 e la linea cellulare normale HDFn. I parametri di sensibilità al farmaco sono stati valutati utilizzando il test MTT (3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5 difeniltetrazolio bromuro) in tandem con la quantificazione spettrofotometrica. Infine, sono stati utilizzati esperimenti di ibridazione in situ con fluorescenza dell’RNA (RNA-FISH) per visualizzare le trascrizioni dell’RNA messaggero bersaglio nelle cellule in coltura. La significatività statistica dei risultati è stata verificata utilizzando i test di analisi della varianza a una via (ANOVA).

Risultati dello studio

La purificazione del fungo BED ha prodotto due frazioni di sRNA uniche, denominate BEDA e BEDB. Sorprendentemente, la purificazione ABI ha prodotto solo una frazione (ABIA), suggerendo che non tutti i funghi (o i loro sRNA) sono chimicamente e funzionalmente simili.

Le valutazioni delle linee cellulari sull’efficacia dell’sRNA hanno rivelato che ABIA era in grado di sopprimere la vitalità delle cellule tumorali a una concentrazione di 50 µg/mL. Sebbene concentrazioni più elevate abbiano soppresso il cancro in modo più efficace, si sono rivelate citotossiche per le cellule normali e quindi necessitano di ulteriori ricerche per chiarire i loro dosaggi ideali. Al contrario, BEDA non ha mostrato alcuna proprietà antitumorale.

BEDB e CCI3 si sono rivelati i migliori agenti antitumorali, dimostrando un’elevata efficacia antitumorale a bassi dosaggi e una normale citotossicità cellulare solo a concentrazioni molto più elevate (250 µg/mL). I risultati di miRNA BED e ABI differivano dai risultati CCI3 precedentemente riportati non mostrando differenze statisticamente significative tra cancro e cellule normali, scontando la loro efficacia come terapie antitumorali.

“Nonostante la purezza e il peso molecolare simili rispetto alle frazioni CCI3 e BEDB, i campioni BEDS e BEDH non hanno mostrato lo stesso effetto biologico. Questi dati suggeriscono una diversa struttura primaria dell’sRNA e un effetto dipendente dalla sequenza. Per capire se l’effetto di CCI3 e BEDB fosse sequenza-dipendente e se la sequenza isolata in queste frazioni fosse simile, abbiamo effettuato un RNA-FISH in cellule Caco-2 non trattate e trattate con CCI3 e BEDB per 96 ore, utilizzando un clone isolato da CCI3 come sonda“.

Leggi anche:Come i funghi migliorano l ipertensione

I risultati di RNA-FISH hanno rivelato che le frazioni BEDB e CCI3 erano simili per oltre l’80% nella sequenza genetica, suggerendo che entrambe le frazioni sono arricchite nella stessa sequenza di sRNA. “Tuttavia, saranno necessari ulteriori studi funzionali per comprendere il loro bersaglio nelle cellule tumorali e il meccanismo alla base della loro capacità antitumorale”.

Fonte: Medical Sciences Forum